CONTRIBUCION DE LA CITOMETRIA DE FLUJO AL DIGNOSTICO Y ESTUDIO DE LAS INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS.

M. Hernández, I. Caragol y T. Español. Unidad Inmunología. C.S.Vall d'Hebron. Barcelona.

Las inmunodeficiencias primarias (IDP) son enfermedades que se desarrollan naturalmente, cuando existen defectos en el sistema inmune. Como resultado de estos defectos primarios, los pacientes presentan infecciones recurrentes, debidas a virus, bacterias, protozoos y hongos, con una severidad variable. El sistema inmunitario también puede ser alterado secundariamente, como resultado de la presencia de diferentes condiciones patológicas (desnutrición, enfermedades metabólicas, procesos malignos, infección, etc) produciéndose inmunodeficiencias secundarias. En ambos casos se debe evaluar el estado del sistema inmunitario, estudiando el fenotipo y la función de las distintas células que componen este. Una herramienta fundamental para este estudio es la citometría de flujo (CMF) ya que nos permite averiguar con gran exactitud, precisión, detectabilidad, objetividad, rapidez y poca muestra los parámetros que nos interesan. Por lo que los datos inmunológicos necesarios para el diagnóstico de las inmunodeficiencias son obtenidos en parte gracias a la CMF. Cuando existe una sospecha de IDP en un paciente, en nuestro Laboratorio realizamos un "screening" del fenotipo de las principales poblaciones linfocitarias, estudiando los siguientes antígenos de membrana:

a) Linfocitos T: CD3, CD4, CD8, TCR ,á, TCR ¾.

Subpoblaciones CD4 y CD8: CD45RA, CD45RO
Activados: CD25, HLA-DR
b) Linfocitos B: CD19
c) NK: CD16, CD56
d) Moléculas de adhesión: CD18
e) Antígenos de activación tras estímulo con mitógenos: CD25.
Dependiendo de los resultados obtenidos en este primer estudio se ampliará posteriormente el mismo, analizando otros antígenos.
Existen una serie de IDPs en las que el estudio fenotípico por CMF contribuye de una manera importante al dignóstico de éstas:

1. Inmunodeficiencias combinadas: Caracterizadas por defectos tanto en células B como en T.

1.1. Inmunodeficiencia severa combinada:
a) Ligada al cromosoma X: Debida a mutaciones de la cadena #190 del receptor de la IL2,4,7,9,15.
- Células B: normales o aumentadas.
- Células T: Muy disminuidas.
b) Autosómica recesiva: Debida a defectos en la maduración de los linfocitos T y B. - Células B: Muy disminuidas o normales.
- Células T: Muy disminuidas.
1.2. Deficiencias de adenosina deaminasa (ADA): Defectos T y B debidos a la acumulación de metabolitos tóxicos (dATP, etc) por una inadecuada función del ADA.
- Células B: Progresiva disminución.
- Células T: Progresiva disminución.
1.3. Deficiencia de purina nucleósido fosforilasa (PNP): Defecto T debido a metabolitos tóxicos (dGTP, etc) por una inadecuada función del PNP.
- Células B: Normales.
- Células T: Progresiva disminución.
1.4. Déficit de antígenos del complejo principal hispocompatibilidad (CPH) de la clase II: Debido a mutaciones en los factores de transcripción (CIITA o genes RFX-5) para las moléculas del CPH de clase II.
- Células B: Normal.
- Células T: Normal, disminuido el número de CD4.
1.5. Disgenesia reticular: Debido a un defecto en las células "stem".
- Células B: Muy disminuidas.
- Células T: Muy disminuidas.
1.6. Déficit de CD8: Debida a mutaciones en el gen de la cinasa Zap-70
- Células B: Normales.
- Células T: CD8 disminuidos, CD4 normales.
2. Defectos predominantemente de anticuerpos: En estos pacientes existe una defectuosa produccióon de anticuerpos.
2.1. Agammaglobulinemia ligada al cromosoma X: Debida a mutaciones en gen de la btk.
- Células B: Muy disminuidas o ausentes.
2.2. Síndrome de hiper IgM:
a) Ligado al cromosoma X: Debido a mutaciones en el gen del CD40L.
- Células B: Sólo presentes células IgM e IgD.
- Células T Activadas: No hay expresiones del CD40L.
b) Otras: Debido a un defectuoso cambio de isotipo.
- Células B: Sólo presentes células IgM e IgD.
- Células T Activadas: Hay expresiones del CD40L.
2.3. Inmunodeficiencia variable común: No se conoce el origen.
- Células B: Normales o disminuidas.
- Células T: Disminuido porcentaje de la subpoblación CD4+CD45RA+, inversión de cociente CD4/CD8, etc, en algunos pacientes.
- Células T activadas: Expresión normal/disminuida del CD40L.
3. Defectos de función fagocítica.
3.1. Enfermedad granulomatosa crónica: Debida a un fallo en la producción de metabolitos superóxido.
a) Ligada al cromosoma X: Debida a un déficit de la cadena de 91 kD del citocromo b.
- Test de oxidación (CMF utilizando DHR): alterado en afectos, patrón bimodal en portadoras.
b) Autosómica recesiva: Debida a falta de otras cadenas peptídicas que componen el citocromo b.
- Test de oxidación (CMF utilizando DHR): alterado en afectos.
3.2. Defecto de moléculas de adhesión 1: Debido a defecto en la expresión de la cadena (CD18) del LFA-1.
- Test de oxidación (CMF utilizando DHR y activado con PMA): Normal. (Activado con partículas): alterado.
- Test de fagocitosis (CMF): alterado.